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牛ELISA試劑盒操作使用步驟是怎樣的

 更新時(shí)間:2022-01-18 點(diǎn)擊量:1293
   牛ELISA試劑盒使用步驟是怎樣的:
  1.即將進(jìn)行試驗(yàn)的版孔進(jìn)行設(shè)定好,規(guī)范品5個(gè)點(diǎn),每個(gè)點(diǎn)設(shè)定平行,需求用到10個(gè)孔,空白只需1個(gè)孔。剩下孔能夠做為樣本孔
  2.稀釋規(guī)范,準(zhǔn)備好5個(gè)EP管,然后在每個(gè)EP管中參加150微升規(guī)范稀釋液,編上編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號(hào)管中參加150規(guī)范品,用槍頭重復(fù)吹打10次左右(留意操控起伏不要過大簡(jiǎn)單發(fā)生氣泡)如果有渦旋儀能夠在渦旋儀上渦旋5秒左右,然后換槍頭,在1號(hào)管中取150微升參加到2號(hào)管,后面進(jìn)程一次類推。終稀釋完,前面4個(gè)管中每管液體在150微升,5號(hào)管為300微升。濃度是從大到小。
  3.規(guī)范、樣本、空白加樣:規(guī)范是每個(gè)濃度點(diǎn)2個(gè)孔(做平行),每孔參加50微升,加樣進(jìn)程中留意換槍頭,樣本孔中每孔參加50微升,加樣進(jìn)程中留意換槍頭,空白孔參加50微升蒸餾水。特別要闡明的是,規(guī)范加樣和樣本加樣盡量操控在15分鐘內(nèi)加完,如果時(shí)刻拖的太長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致前面孔先反響后面孔才開端反響,這樣數(shù)值誤差過大。加完樣后蓋上封板膜,至37攝氏度孵育30分鐘.
  4.洗版,在孵育進(jìn)程中能夠?qū)⑾礈煲号浜茫?0ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或許去離子水定容到600ml即可。每孔參加250-300微升的洗滌液(不要漫過版孔),(如果有震動(dòng)儀的話,能夠講板子放入震動(dòng)儀上5秒左右,然后靜止三十秒,沒有請(qǐng)疏忽次進(jìn)程)將板子在桌子上晃動(dòng)5秒左右,然后靜置30秒,甩干,決定。闡明:甩干進(jìn)程盡量要快,1秒內(nèi)就能夠完結(jié),不要漸漸歪斜倒掉液體,直接翻板甩掉液體即可。決定進(jìn)程需求在桌子上墊一層吸水紙或許濾紙,版孔朝下拍幾下,拍干差異主要看吸水紙和濾紙上沒有顯著的水漬為完結(jié)。
  5.每孔參加50微升的酶標(biāo)試劑,此處在空白孔中不需求加(空白孔為空),孵育30分鐘。
  6.洗版進(jìn)程與4一樣。
  7.顯色,先每孔中參加50微升的顯色A液,然后每孔中參加50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘
  8.停止,每孔參加50微升的停止液,留意,加完停止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù),超越時(shí)刻讀數(shù)無效。在規(guī)則時(shí)刻內(nèi)讀數(shù)都是有用的。
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